流式细胞术
表染（表染流式buffer或1640稀释抗体）
- 收集待染色的细胞入流式管，编号；向流式管中细胞悬液补充1ml 1640，离心，弃上清（悬液体积太小，不便离心后弃上清）
- 将抗体稀释配成体系（流式buffer稀释），按1/3ul（原浓度）抗体每管，每管加入100ul稀释后抗体，避光冰上染色30min
（染色加抗体时，若每管染色抗体数不同或有管未染色，需加等体积抗体稀释液，控制变量）
- 加3倍体积1640终止染色，300Gx5min离心弃上清
- 加100ul1 1%多聚甲醛固定（若继续胞内或核内染色则不需多甲固定，直接第5步）
胞内和核染（胞内核内染色用perm稀释抗体）
- 将待染色细胞铺于12孔板，加入cocktail（有成品,为一混合物，含有信使物质，可刺激细胞开始胞内合成；另高尔基STOP使合成物质不分泌，故胞内含量增高，便于染色），置于Co2培养箱刺激4-6h
- 300Gx5min离心弃上清，1640重悬，表染同步骤1-3
- 表染后的细胞，每管加配制好的cytofix 200ul固定30min（离心过后细胞200 ul fix ，轻轻摇晃将细胞重悬），加3倍体积perm终止，300Gx5min离心弃上清
- 加cytoperm破膜稀释的胞内抗体染料和核内抗体染料，边破膜边染色30min。
- 加3倍体积1640终止，300Gx5min离心弃上清
- 加100ul 1%多聚甲醛固定（防止细胞自溶），准备流氏分析
不同Kit操作可能不同，注意阅读操作说明
